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  概述

  非整倍体无限细胞系和癌细胞株中,仍然存在不同细胞亚群,它们的功能和生长特点有些差异,其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力,细胞集落率高。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大,一般初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强;二倍体细胞克隆形成率弱,转化细胞系强;正常细胞克隆形成率弱,肿瘤细胞强。

  集落形成实验广泛用于抗癌药物敏感试验、肿瘤细胞功能学试验等。根据实验方法分为平板克隆形成实验和软琼脂克隆形成实验。
 

  平板克隆形成技术路线

  (1)细胞消化、重悬

  (2)将细胞悬液作梯度倍数稀释,以适当的细胞密度,培养2~3周。

  (3)固定,染色。

  (4)显微镜计数克隆数。
 

  软琼脂克隆形成技术路线

  (1细胞消化、重悬

  (2)制备1.2%和0.7%两个浓度的低溶点琼脂糖液,高压灭菌

  (3)按1:1比例使1.2%的琼脂糖和2×DMEM培养基混合,制备底层琼脂

  (4)按1:1比例让0.7%的琼脂糖和2×DMEM培养基混合,加入细胞悬液混匀,注入铺有琼脂糖的底层平皿中,逐形成双琼脂层。培养10~14天。

  (5) 显微镜计数克隆数。
 

  客户提供

  1、 冻存的细胞或者生长状况良好的细胞株,培养条件及相关注意事项(或由本公司提供或代购)

  2、 细胞处理试剂和处理方案
 

  瑞吉因提供

  1、 实验过程图片

  2、 实验报告(实验仪器及厂家;实验试剂及厂家批号;实验步骤;实验结果);

  3、 实验记录本

  4、 流式检测结果图片

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