概述

　　蛋白-蛋白相互作用是蛋白质结构与功能研究中最重要的方面之一。GST pull-down原理是将靶蛋白与GST融合表达，并将蛋白固化在谷胱甘肽(GSH)亲和树脂上，作为与目的蛋白亲和的支撑物，充当“诱饵蛋白”，目的蛋白溶液过柱，可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白)，洗脱结合物后通过电泳分析，从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白。"诱饵蛋白"和"捕获蛋白"均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。

　　技术路线

　　1、原核融合蛋白A(GST-A融合蛋白)的获得;

　　2、真核融合蛋白B(cMyc-B融合蛋白)的获得;

　　3、谷胱甘肽-琼脂糖树脂的处理;

　　4、 谷胱甘肽-琼脂糖树脂结合GST融合蛋白;

　　5、预清除细胞裂解液;

　　6、 探测细胞裂解液。

　　客户提供

　　1、 兴趣基因的质粒或序列相关信息

　　2、 特异性一抗(或由瑞吉因代购)

　　瑞吉因提交

　　1、构建得到的兴趣基因表达质粒

　　2、westem blot检测结果

　　3、实验报告(实验步骤、主要仪器及厂家、主要试剂及厂家批号、实验结果)

　　4、实验记录本

　　5、原始图片及数据