概述
在传统光学显微镜基础上,激光扫描共聚焦显微镜用激光作为光源,采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图像处理观察、分析和输出。可以对样品进行断层扫描和成像,进行无损伤观察和分析细胞的三维空间结构。同时,利用免疫荧光标记和离子荧光标记探针,该技术不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可以对活细胞的结构、分子、离子及生命活动进行实时动态观察和检测,成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。
技术路线:
1、细胞爬片
2、抗体的孵育:预实验的时候荧光根据文献和经验设定一、二抗的浓度,一抗4度孵育过夜(时间8~12 h);二抗(荧光抗体)孵育时要避光,孵育好后用PBS充分冲洗;可以将做好的片子直接在板子中孵育,如果从节约的角度来看,可以用24孔板比较好。
3、做好以上步骤后,将板子里放点PBS,保存片子湿润,不要干片,这样会影响细胞形态。
4、到激光共聚焦观察室后,再将爬片取出,在干净的载玻片上滴一滴荧光保护剂,然后将爬片取出来倒扣在滴过荧光保护剂的载玻片上。
5、显微镜下观察。
客户提供:
1、待处理的细胞和处理方案
2、一抗(注意种属,或由我方代购)
瑞吉因提供:
1、染完后的片子
2、采图(每组2张 )
3、实验结报告(实验步骤;主要仪器及厂家;主要试剂及厂家批号;实验结果)
4、实验记录本
5、原始实验结果及数据
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